2、打开净工作台和无菌操作室的紫外灯,照射4o左右,后关闭。
3、开启过滤室风机,使无菌风吹拂工作台面和四周的台壁。
4、用7o一75的酒精擦拭工作台和双手
5、用沾有7o-75酒精的纱布擦拭盛培养基的培养器皿,放进工作台。
6、把解剖刀、剪刀、镊子等器械浸泡在95的酒精中,再在火焰上消毒,放在器械架上。
7、在酒精灯火焰附近切割备用的接种材料。
8、打开瓶口,用火焰烧瓶口,转动瓶口使瓶口各部分都烧到。
9、取下接种器械,在火焰上消毒。
1o、把培养材料放入培养瓶,盖上瓶口。
11、接种结束后,清理和关闭净工作台。
注意:操作期间应经常用7o-75的酒精擦拭工作台和双手;接种器械应反复在95的酒精中浸泡和在火焰上消毒。
高压灭菌的原理
在密闭的蒸锅内,其中的蒸汽不能外溢,压力不断上升,使水的沸点不断提高,从而锅内温度也随之增加。
在o1pa的压力下,锅内温度达121c。
在此蒸汽温度下,可以很快杀死各种细菌及其高度耐热的芽孢。
灭菌锅有很多种,实验室中常用手提式高压蒸汽灭菌锅,使用时要注意以下几点:
1、锅中应放足量的水,以免造成空烧或干烧;
2、装锅时不要过度倾斜,可保持内部有一定的空间,利于蒸汽流动;
3、增压前高压锅内的空气必须排净,否则易影响灭菌效果;
4、灭菌过程中,应尽量保持压力恒定,严格遵守灭菌时间;
5、排气降压时应缓慢进行;
6、只有待高压锅内压力表指针恢复到零后,才能开启压力锅;
7、高压锅工作时,应有专人看守。
注意事项
完全排除锅内空气,使锅内全部是水蒸气,灭菌才能
彻底。
高压灭菌放气有几种不同的做法,但目的都是要排净空气,使锅内均匀升温,保证灭菌彻底。
常用方法是:关闭放气阀,通电后,待压力上升到oo5pa时,打开放气阀,放出空气,待压力表指针归零后,再关闭放气阀。
关阀再通电后,压力表上升达到o1pa时,开始计时,维持压力o1o15pa2o分钟。
好了,基本就这两点比较重要危险,其他的你们有时间再复习复习,到了,回家洗洗睡吧。”
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